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      洛陽惠爾納米科技有限公司-核酸提取儀 官網

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      核酸分離提取
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      四大經典核酸純化方法及評價
      2014-03-20 13:47   查看  

      洛陽惠爾納米科技園 河南省重點納米生物材料工程實驗室)
       
           核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎,核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的最重要因素,也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。目前常見的核酸純化方法有PC 抽提/醇沉淀方法、高鹽沉淀蛋白質/醇沉淀方法、離心柱法和生物磁珠法,這幾種方法各有其優勢和劣勢。
      一、PC抽提法
           PC 抽提是去除蛋白質有效的手段,但超過了該飽和度,裂解體系中的蛋白質不會被一次去除,必須靠多次抽提,方可徹底去除。且每次抽提都會損失部分核酸。另外,體系太粘稠的壞處是,蛋白質難以徹底去除,以及基因組 DNA 會斷裂得更厲害,所以要注意裂解液與樣品的比例。PC 抽提的另外一個用途是,利用酸性酚可以部分去除 DNA 的特點,在 RNA 抽提時獲得 DNA 殘留極少的 RNA。不過有一點要提醒的是,某些植物樣品,在去除某些雜質之前,是不能使用 PC 抽提的,否則核酸必定降解。PC抽提最大的優勢是成本低廉,對實驗條件要求較低,對于經費緊張的實驗室較為實用。
      二、高鹽沉淀法
           高鹽沉淀蛋白質/醇沉淀方法,同樣也是一個非常不錯的方法。與 PC 抽提方法相比,除了純度的穩定性可能要低一點外,該方法幾乎克服了 PC 抽提的所有缺點。更快、更輕松的去除蛋白質所可以用于大規模抽提,但其不足之處是純度 (蛋白質殘留) 不夠穩定,蛋白質的沉淀效率在4℃會更好一些。
      三、離心柱法
           離心柱純化法,是目前試劑盒提取廣泛應用的方法。其最大特點是受人為操作因素影響小,純度的穩定性很高 (雖然純度不一定比PC 純化方法更高)。加入的液體通過離心后會進入另外一個離心管中,與含有核酸的柱子完全是分開的,所以洗滌更徹底。其致命弱點是樣品過量,提取效率較低,且需要反復離心,操作復雜,成本也較高。
      四、生物磁珠法
           生物磁珠法是將純化介質包被在納米級生物磁珠表面,通過介質對核酸的吸附,在外加磁場下使核酸附著于磁珠定向移動,從而達到固液分離純化的作用。與其他幾種方法相比,生物磁珠法具有很多無法比擬的優勢,如:
      ①提取靈敏度高(微量材料即可提取)
      ②純化純度高(完全與蛋白鹽等雜質分離)
      ③提取產量高(每mg磁珠能吸附500ug DNA)
      ④分離快速(磁分離只需幾秒)
      ⑤自動化操作(加液后完全機器自動化操作,無需人力,提高效率)
      ⑥高通量提取(可同時完成幾十甚至幾百個樣品的提取)
      ⑦無毒無害無污染(試劑中不含任何氯仿、酚等,操作環境更加安全)
           生物磁珠法純化核酸的普及需要磁分離裝置的同步跟進,如磁力架或自動提取儀。目前,各類磁分離裝置主要來自于進口,不僅價格較高,而且售后服務質量也偏低。因此,向大家推薦洛陽惠爾納米科技園自主研發的磁力架、磁力筆及全自動核酸提取儀,該裝置通過技術創新,大大提高了靈活機動性,在操作上更加方便快捷,有效解決了磁分離裝置對磁珠法核酸提取的限制,受到科研工作者的一致好評。
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